Recultivo de plântulas de Orquídeas (Método Caseiro) e Preparo de Meio de Cultura para essa Prática

Material

Frascos

1. Potes de plástico de 140 mL (encontrados em casas de embalagem ou de
produtos para sorveteria).

Solução de hidróxido de sódio (40 g/L)

1. Hidróxido de Sódio – NaOH (2 g) (pode ser soda cáustica);

2. Seringa de 20 mL.

Solução de água sanitária a 10 %

1. Água sanitária (preferência um frasco novo);

2. Medidor de volume (proveta – farmácias especializadas, ou seringa de 20
mL);

3. Borrifador (casa de embalagem ou farmácia de manipulação).

Meio de Cultura

1. Ágar-ágar (Merck®, Brasileiro® ou Kanten®);

2. Água destilada ou mineral;

3. Produto contendo os componentes de meio de cultura específico para orquídeas (B&G Flores® – Meio de Cultura Suprimento: Orquídea);

4. Panela de vidro, ou de teflon, ou de aço;

5. Filme de PVC;

6. Água sanitária (de preferência um frasco novo);

7. Seringa de 20 mL;

8. Medidor de volume (proveta – farmácias especializadas, ou potes de cozinha);

9. Solução de NaOH (40 g/L);

Recultivo

1. Pinça de 25 cm;

2. Borrifador com a água sanitária a 10 %;

3. Tubo de ensaio ou frasco comprido que caiba 2/3 da pinça;

4. Álcool 93,8 (farmácia – não usar álcool 92,8);

5. Algodão;

6. Frasco de vidro ou copo;

7. Filme de PVC;

8. Lamparina (ou vela);

9. Pires;

10. Etiquetas adesivas;

11. Lápis ou caneta;

12. Água sanitária (de preferência um frasco novo);

13. Frascos com meio de cultura esterilizados com água sanitária.

Procedimentos

Para o preparo da solução de hidróxido de sódio (40 g/L)

1. Com o auxílio da seringa de 20 mL, coloque 50 mL de água destilada ou mineral em um recipiente de plástico;

2. Pese e acrescente à água 2 g de NaOH.

Para o preparo da solução de água sanitária 10 %

1. Com o auxílio de uma proveta ou da seringa de 20 mL, meça 180 mL de água destilada ou mineral;

2. Com o auxílio da seringa de 20 mL, meça 20 mL de água sanitária e acrescente-a aos 180 de água destilada ou mineral.

Para o preparo de 1 L do meio de cultura devem-se seguir os seguintes
passos:

1. Antes de começar a prepara o meio de cultura deixe os frascos de plásticos sobre uma bancada no jeito de receberem o meio de cultura. Para isso, retire, rapidamente, os frascos da embalagem, coloque-os sobre a bancada e cubraos com suas tampa, mas sem fechá-los, deixando as tampas soltas.

2. Coloque na panela 1 L de água destilada ou mineral;

3. Pese e acrescente a 1 L de água destilada ou mineral 47 g (1 sachê) do Meio de Cultura Suprimento da B&G flores®;

4. Pese e acrescente à água, ainda fria, o ágar-ágar (7 g/L de ágar-ágar Merck®, Vetec® ou Brasileiro®, ou 10 g/L de ágar-ágar Kanten®);

5. Misture bem todos os ingredientes do meio;

6. Leve a panela, contendo toda a mistura, ao fogo. Espere levantar fervura, depois desligue o fogo;

7. Espere esfriar por 10 minutos;

8. Acrescente 25 mL de água sanitária (use a seringa para medir);

9. Acrescente 3 mL da solução de NaOH (40 g/L);

10. Distribua o meio, com o auxílio de um pote de plástico com bico e alça, nos frascos de plásticos. Coloque, aproximadamente, 1 cm de altura de meio de cultura (+/- um dedo de altura – 40 mL por frasco);

11. Agora, feche completamente os frascos com suas tampas;

12. Passe o filme de PVC em torno da tampa, dando duas voltas nessa. Para isso corte o filme de PVC de forma que fique com, aproximadamente, 5 cm de comprimento.

Para o recultivo devem-se seguir os seguintes passos:

1- Coloque a pinça dentro do tubo de ensaio contendo um algodão no fundo e o álcool 93,8. Logo após, flambe-a 5 vezes, para isso retire a pinça do álcool, deixe escorrer o excesso de álcool e passe-a sobre a chama da lamparina. Em seguida, escore a pinça sobre o pires;

2- Abra o frasco contendo as plântulas de orquídeas que se deseja recultivar;

3- Abra o frasco contendo o Meio de Cultura Suprimento da B&G flores®;

4- Retire as plântulas do frasco velho, com o auxilío da pinça, e transplanteas no novo meio de cultura. Coloque no máximo 20 plântulas por frasco (use sempre a relação de 1 plântula para 2 mL de Meio de Cultura Suprimento da B&G flores®);

5- Ao terminar, volte com a pinça para o álcool;

6- Tampe o frasco velho;

7- Borrife a solução de água sanitária a 10 % sobre as plântulas recém transplantadas e a tampa do frasco novo;

8- Tampe o frasco;

9- Passe o filme de PVC em torno da tampa, dando duas voltas nessa. Para isso corte o filme de PVC de forma que fique com, aproximadamente, 5 cm de comprimento;

10- Proceder a identificação do frasco colando a etiqueta adesiva, que já contem a identificação do das plântula e a data do recultivo, nesse

11- Em cultivos comerciais ou laboratório, manter sob condições de sala de cultivo, e em cultivos domésticos manter sob condições de luz indireta, como por exemplo, uma prateleira próxima a uma janela, em uma varanda, ou mesmo no orquidário.

Obs.: Todo o material que for utilizado durante o preparo do meio e o recultivo deverá ser desinfetado com água sanitária (medidor de volume, borrifador, seringa de 20 mL, tubo de ensaio, frasco de vidro ou copo, pires, pote plástico com bico e alça, etc.).